技術(shù)服務(wù)

技術(shù)服務(wù)表單下載：實(shí)時熒光定量PCR服務(wù)表單 

我們專業(yè)提供qPCR檢測服務(wù)，技術(shù)精湛，價(jià)格優(yōu)惠，內(nèi)參免費(fèi)，多臺qPCR儀，檢測速度30張96孔板/天，一般5-10天出實(shí)驗(yàn)結(jié)果，承接全國各地訂單，歡迎咨詢！

熒光定量PCR技術(shù)是通過熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性探針，對PCR產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤，實(shí)時監(jiān)控反應(yīng)過程。隨著PCR 反應(yīng)的進(jìn)行，反應(yīng)產(chǎn)物不斷累積，熒光信號強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一次熒光強(qiáng)度信號，這樣就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，結(jié)合相應(yīng)的軟件對產(chǎn)物進(jìn)行分析，可以得到熒光擴(kuò)增曲線，計(jì)算待測樣品初始模版的量。

 
實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)是一次由定性技術(shù)向定量技術(shù)的飛躍，運(yùn)用該項(xiàng)技術(shù)，可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行相對定量、絕對定量和定性分析。君諾德生物基于多年的經(jīng)驗(yàn)，可以提供mRNA 表達(dá)量水平檢測、microRNA 表達(dá)量水平檢測和基因拷貝數(shù)檢測。實(shí)驗(yàn)的方法可分為SYBR Green I 法和TaqMan探針法，測定靈敏、特異性強(qiáng)，易于使用。

實(shí)時熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)流程：

服務(wù)項(xiàng)目：
1．相對定量：

對待測樣品進(jìn)行某一特定基因的檢測并確定待測基因相對于某一特定管家基因以及該基因在實(shí)驗(yàn)組中相對于對照組的相對表達(dá)情況。參考基因和靶基因表達(dá)分析，包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄和擴(kuò)增，采用SYBR Green I法和TaqMan探針法兩種方式，一般采用2－ΔΔ Ct法進(jìn)行計(jì)算。每個樣本重復(fù)三次，一般情況我公司提供內(nèi)參基因引物。

檢測服務(wù)包括：mRNA，miRNA，lncRNA，circRNA，端粒長度檢測

2．絕對定量：

對待測樣品進(jìn)行某一特定基因的檢測并確定樣本中基因的拷貝數(shù)。需要制備標(biāo)準(zhǔn)品并建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后檢測目的樣本中的基因，比對標(biāo)準(zhǔn)曲線得到基因準(zhǔn)確拷貝數(shù)，標(biāo)準(zhǔn)品制備單獨(dú)收費(fèi)。DNA(RNA) 的絕對定量分析;轉(zhuǎn)基因拷貝數(shù)測定，病毒和病原量化。

3.  定性分析： 

對待測樣品進(jìn)行某一特定基因的檢測。檢測病毒，檢測轉(zhuǎn)基因，確定品種，突變基因分型

4. 單核苷酸多態(tài)性分析(終點(diǎn)法)： 

人類疾病分析;個性化醫(yī)療;單核苷酸多態(tài)性分析：Taqman-MGB，KASP
 
送樣要求：
1. 樣品要求：細(xì)胞（≥10⁶ ）、組織（≥300mg）、血液（≥1ml）、葉片（≥100mg）等樣品材料，基因組DNA，cDNA不少于30 μg，總RNA（體積≥20μl，濃度≥100 ng/μl）。組織需液氮速凍、細(xì)胞收獲后加入Trizol保存于-80度，樣品用干冰寄送。避免各類污染和反復(fù)凍融。

2. 詳細(xì)填寫技術(shù)服務(wù)表單，根據(jù)客戶所填寫表單信息分析實(shí)驗(yàn)，報(bào)價(jià)和周期；

技術(shù)服務(wù)表單信息包括：

客戶信息：開票信息，聯(lián)系方式等；

靶基因信息：包括基因序列或GenBank Accession Number 等；

背景資料：包括生物物種信息（Human、Mouse、Rat 等）、擴(kuò)增目的基因NCBI登錄號、DNA/RNA 來源、相關(guān)文獻(xiàn)等。

 
提交結(jié)果：

完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括擴(kuò)增曲線，標(biāo)準(zhǔn)曲線，溶解曲線，引物和探針及序列，電泳圖，CT值，原始數(shù)據(jù)，數(shù)據(jù)分析結(jié)果等。 

收費(fèi)方式：(全國范圍誠招技術(shù)服務(wù)代理商)

具體服務(wù)價(jià)格，根據(jù)不同qPCR方法，待檢測樣品數(shù)量，基因數(shù)量決定的，具體請?jiān)儍r(jià)！

mRNA熒光定量檢測：

服務(wù)內(nèi)容	收費(fèi)方式	優(yōu)惠價(jià)	時間
總RNA提取及反轉(zhuǎn)錄	60-120元/樣品	根據(jù)具體項(xiàng)目報(bào)價(jià)	2-3天
引物設(shè)計(jì)合成篩選	100元/基因	100元/基因	2-5天
內(nèi)參基因	一般免費(fèi)	樣品和基因數(shù)太少內(nèi)參算一個基因
mRNA表達(dá)量檢測(三個重復(fù))	120元/基因	75元/基因/三個重復(fù)	1-3天
數(shù)據(jù)整理	免費(fèi)	結(jié)果分析及報(bào)告	1-2天

LncRNA熒光定量檢測：

服務(wù)內(nèi)容	收費(fèi)方式	優(yōu)惠價(jià)	時間
總RNA提取及反轉(zhuǎn)錄	60-120元/樣品	根據(jù)具體項(xiàng)目報(bào)價(jià)	2-3天
引物設(shè)計(jì)合成篩選	100元/基因	100元/基因	2-5天
內(nèi)參基因	一般免費(fèi)	樣品和基因數(shù)太少內(nèi)參算一個基因
LncRNA表達(dá)量檢測(三個重復(fù))	120元/基因	96元/基因/三個重復(fù)	1-3天
數(shù)據(jù)整理	免費(fèi)	結(jié)果分析及報(bào)告	1-2天

miRNA熒光定量檢測：

服務(wù)內(nèi)容	收費(fèi)方式	優(yōu)惠價(jià)	時間
總RNA提取及反轉(zhuǎn)錄	100-120元/樣品	根據(jù)具體項(xiàng)目報(bào)價(jià)	2-3天
引物設(shè)計(jì)合成篩選	200元/基因	160元/基因	2-5天
內(nèi)參基因	一般免費(fèi)	樣品和基因數(shù)太少內(nèi)參算一個基因
mRNA表達(dá)量檢測(三個重復(fù))	180元/基因	144元/基因/三個重復(fù)	1-3天
數(shù)據(jù)整理	免費(fèi)	結(jié)果分析及報(bào)告	1-2天

circRNA熒光定量檢測：

服務(wù)內(nèi)容	收費(fèi)方式	優(yōu)惠價(jià)	時間
總RNA提取及反轉(zhuǎn)錄	60-120元/樣品	根據(jù)具體項(xiàng)目報(bào)價(jià)	2-3天
引物設(shè)計(jì)合成篩選	200元/基因	160元/基因	2-5天
內(nèi)參基因	一般免費(fèi)	樣品和基因數(shù)太少內(nèi)參算一個基因
circRNA表達(dá)量檢測(三個重復(fù))	200元/基因	160元/基因/三個重復(fù)	1-3天
數(shù)據(jù)整理	免費(fèi)	結(jié)果分析及報(bào)告	1-2天

服務(wù)內(nèi)容	收費(fèi)方式	優(yōu)惠價(jià)	時間
基因組DNA提取	20-80元/樣品	根據(jù)具體項(xiàng)目報(bào)價(jià)	2-3天
標(biāo)準(zhǔn)品構(gòu)建	600-800元/標(biāo)準(zhǔn)品/基因	根據(jù)具體項(xiàng)目報(bào)價(jià)	2-5天
引物設(shè)計(jì)合成篩選	100元/基因	100元/基因
絕對定量檢測(三個重復(fù))	60元/基因/三個重復(fù)	60元/基因/三個重復(fù)	1-3天
數(shù)據(jù)整理	免費(fèi)	結(jié)果分析及報(bào)告	1-2天

端粒相對長度檢測：

服務(wù)內(nèi)容	收費(fèi)方式	優(yōu)惠價(jià)	時間
基因組DNA提取	20-80元/樣品	根據(jù)具體項(xiàng)目報(bào)價(jià)	2-3天
引物設(shè)計(jì)合成	100元/基因	100元/基因	1-2天
端粒相對長度檢測(三個重復(fù))	120元/基因/三個重復(fù)	根據(jù)具體項(xiàng)目報(bào)價(jià)	1-3天
數(shù)據(jù)整理	免費(fèi)	結(jié)果分析及報(bào)告	1-2天

端粒酶活性檢測：

服務(wù)內(nèi)容	收費(fèi)方式	優(yōu)惠價(jià)	時間
總RNA提取及反轉(zhuǎn)錄	60-120元/樣品	根據(jù)具體項(xiàng)目報(bào)價(jià)	2-3天
端粒酶引物設(shè)計(jì)合成	100元/基因	100元/基因	2-5天
內(nèi)參基因	一般免費(fèi)	樣品數(shù)太少內(nèi)參算一個基因
端粒酶活性檢測(三個重復(fù))	120元/基因	75元/基因/三個重復(fù)	1-3天
數(shù)據(jù)整理	免費(fèi)	結(jié)果分析及報(bào)告	1-2天

常用網(wǎng)站：

1. NCBI：https://www.ncbi.nlm.nih.gov

2. DDBJ：https://www.ddbj.nig.ac.jp

3. EMBL-EBI：https://www.ebi.ac.uk

4. UCSC：http://genome.ucsc.edu

5. qPCR Primer Database：https://biodb.swu.edu.cn/qprimerdb

6. The real-time PCR primer and probe database：http://www.rtprimerdb.org

7. PrimerBank：https://pga.mgh.harvard.edu/primerbank 

8. miRBase：http://www.mirbase.org/