技術(shù)服務(wù)

Western免疫印跡（Western Blot）是將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到膜上，然后利用抗體進(jìn)行檢測(cè)的方法。對(duì)已知表達(dá)蛋白，可用相應(yīng)抗體作為一抗進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)新基因的表達(dá)產(chǎn)物，可通過(guò)融合部分的抗體檢測(cè)。

與Southern或Northern雜交方法類似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳，被檢測(cè)物是蛋白質(zhì)，“探針”是抗體，“顯色”用標(biāo)記的二抗。

經(jīng)過(guò)PAGE分離的蛋白質(zhì)樣品，轉(zhuǎn)移到固相載體（例如硝酸纖維素薄膜）上，固相載體以非共價(jià)鍵形式吸附蛋白質(zhì)，且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學(xué)活性不變。以固相載體上的蛋白質(zhì)或多肽作為抗原，與對(duì)應(yīng)的抗體起免疫反應(yīng)，再與酶或同位素標(biāo)記的第二抗體起反應(yīng)，經(jīng)過(guò)底物顯色或放射自顯影以檢測(cè)電泳分離的特異性目的基因表達(dá)的蛋白成分。該技術(shù)也廣泛應(yīng)用于檢測(cè)蛋白水平的表達(dá)。

服務(wù)內(nèi)容： 
1. 從細(xì)胞、人或動(dòng)物組織、細(xì)菌、植物、血清等樣品中提取蛋白 
2. 對(duì)蛋白進(jìn)行定性及定量分析 
3. Western blot檢測(cè) ：
     （1） 電泳：聚丙烯酰胺凝膠（SDS-PAGE）分離蛋白樣品 
     （2） 濕法轉(zhuǎn)印 
     （3） 雜交：用抗體鑒定膜上的特定蛋白
     （4） 化學(xué)發(fā)光檢測(cè)（ECL），膠片曝光，ImageJ軟件讀取灰度值（可選） 
4. 預(yù)實(shí)驗(yàn)及正式實(shí)驗(yàn)：幫助客戶設(shè)計(jì)樣品上樣順序 
5. 免費(fèi)進(jìn)行胞漿蛋白內(nèi)參檢測(cè)（胞核蛋白內(nèi)參需收取費(fèi)用） 

送樣要求：
1. 細(xì)胞＞1×107，組織＞50mg，細(xì)菌濕重＞50mg，植物＞100mg，血清＞50ul；
2. 樣品蛋白濃度＞1mg/ml，蛋白量＞200ug/樣品；
3. 客戶提供材料：新鮮或正確保存的樣品，目的蛋白一抗，陽(yáng)性對(duì)照樣品，相關(guān)文獻(xiàn)；

提交結(jié)果 ：
1、預(yù)實(shí)驗(yàn)曝光結(jié)果（膠片及掃描圖），預(yù)實(shí)驗(yàn)采取2個(gè)一抗稀釋度； 
2、正式實(shí)驗(yàn)曝光結(jié)果（膠片及掃描圖） ；

3、完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告 。

收費(fèi)方式：

蛋白提取費(fèi)用：50元/樣本，1200元/目的蛋白/膜（8-9個(gè)樣本，預(yù)實(shí)驗(yàn)，二抗和內(nèi)參免費(fèi)，一抗代購(gòu)或客戶提供，常用抗體我們有備貨，只收取稍許抗體費(fèi)用）。