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      蛋白互作位點(diǎn)篩查試劑盒/抗原表位篩查/抗體識(shí)別表位篩查

      抗原表位篩查試劑盒(血清樣本) 抗體識(shí)別表位篩查試劑盒(單克隆抗體) 蛋白互作位點(diǎn)篩查試劑盒(各種靶標(biāo)蛋白)

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      抗原表位篩查試劑盒(血清樣本)

      抗體識(shí)別表位篩查試劑盒(單克隆抗體)

      蛋白互作位點(diǎn)篩查試劑盒(各種靶標(biāo)蛋白)

      技術(shù)背景:
      蛋白質(zhì)相互作用廣泛的參與到有機(jī)體的各種生命活動(dòng)中,從細(xì)胞各種基本功能的完成,到細(xì)胞信號(hào)的傳導(dǎo);從微生物感染,到免疫系統(tǒng)識(shí)別;幾乎所有重要的生命活動(dòng),都離不開(kāi)蛋白質(zhì)相互作用。后基因組時(shí)代,蛋白-蛋白相互作用以及他們與疾病發(fā)病機(jī)理之間的關(guān)系,成為科學(xué)研究及藥物開(kāi)發(fā)的熱點(diǎn)領(lǐng)域。目前,許多技術(shù)已開(kāi)發(fā)用于蛋白相互作用研究,多肽陣列技術(shù)以方便快捷高通量的特點(diǎn),成為其中關(guān)鍵且最好的技術(shù)之一。 

      技術(shù)原理:
      作為一種高通量研究工具,多肽陣列是一種高效的生物芯片。根據(jù)已知蛋白質(zhì)序列,截取連續(xù)或非連續(xù)的氨基酸片段(5-20個(gè)氨基酸),又稱(chēng)多肽,使用自動(dòng)化儀器通過(guò)原位合成技術(shù)將上述多肽或特意設(shè)計(jì)的成百乃至上千的多肽以極高的密度置于特殊處理的載體矩陣之上(濾紙等),合成好的陣列芯片與樣本(如血清,抗體溶液及任何其它蛋白質(zhì)溶液)中的目標(biāo)蛋白進(jìn)行反應(yīng),用以闡明已知蛋白相對(duì)于目標(biāo)蛋白的結(jié)合或識(shí)別位點(diǎn)(如抗原表位)。使用這種生物芯片,科學(xué)家們能夠直接揭示蛋白質(zhì)之間相互作用的秘密。 


      產(chǎn)品應(yīng)用:
      多肽陣列被廣泛用于藥物篩選、靶標(biāo)確認(rèn)、表位定位、疫苗開(kāi)發(fā),以及結(jié)構(gòu)功能研究。同時(shí)出于對(duì)多肽藥物不斷增加的興趣,這一技術(shù)也能滿(mǎn)足大量的制藥企業(yè)不斷增長(zhǎng)地對(duì)多肽藥物研發(fā)的需求。
      1、蛋白質(zhì)相互作用位點(diǎn)的發(fā)現(xiàn):使用多肽陣列技術(shù),研究者們能夠進(jìn)行目標(biāo)蛋白質(zhì)與其互作蛋白結(jié)合位點(diǎn)的高通量篩查,例如胞內(nèi)激酶結(jié)合域篩查,以及疾病中功能失調(diào)蛋白結(jié)合位點(diǎn)的檢測(cè)?;プ魑稽c(diǎn)的發(fā)現(xiàn)可作為多肽藥物、工具藥物或藥物靶點(diǎn)進(jìn)行深入研究。
      2、抗原蛋白線(xiàn)性抗原表位的發(fā)現(xiàn):一個(gè)抗原表位是相應(yīng)抗體識(shí)別的一種免疫原的一個(gè)表面結(jié)構(gòu)域。通過(guò)多肽陣列技術(shù),一種病毒或細(xì)菌的所有蛋白能被置于芯片上,并與不同病程的患者血清反應(yīng)。反應(yīng)位點(diǎn)或結(jié)合域被進(jìn)一步篩查以發(fā)現(xiàn)針對(duì)特異抗原表位的保護(hù)抗體。發(fā)現(xiàn)的抗原表位可被用于主動(dòng)或被動(dòng)的特異性免疫反應(yīng),或用于診斷試劑開(kāi)發(fā)。
      3、抗體識(shí)別抗原序列的發(fā)現(xiàn):機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生的抗體主要是識(shí)別抗原蛋白的8-12個(gè)氨基酸片段(或稱(chēng)多肽片段)。應(yīng)用多肽陣列技術(shù)能夠方便快捷地確定制備抗體(單抗或多抗)識(shí)別的線(xiàn)性表位序列,為抗體的開(kāi)發(fā)應(yīng)用提供更直接的識(shí)別序列證據(jù)。

      產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)和特點(diǎn):
      1、高密度、高通量;
      2、高特異性、靈敏度;
      3、高性?xún)r(jià)比、快捷、簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)操作;
      4、結(jié)果精確至氨基酸序列、直觀(guān)、易分析。


      操作步驟:
      1、多肽芯片活化
      2、多肽芯片平衡
      3、多肽芯片封閉
      4、洗膜
      5、靶蛋白孵育
      6、洗膜
      7、二抗孵育
      8、洗膜
      9、ECL顯色
      10、成像
      11、多肽陣列膜保存
      12、膜圖片結(jié)果判讀:
      使用TotalLab或其它圖像分析軟件進(jìn)行圖片顯色點(diǎn)光密度數(shù)據(jù)分析,設(shè)置膜上顯色點(diǎn)光密度值最高的值為100%,其余各點(diǎn)光密度值為該點(diǎn)光密度值的百分比數(shù)值。根據(jù)經(jīng)驗(yàn)及參考文獻(xiàn),選擇光密度值超過(guò)30%的顯色點(diǎn)為陽(yáng)性顯色點(diǎn),從而獲得互作位點(diǎn)多肽序列。


      相關(guān)應(yīng)用:
      1、抗原表位篩查&抗體識(shí)別序列發(fā)現(xiàn)




      2、蛋白相互作用研究

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