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常溫等溫擴增產品 介紹：點擊進入

Basic	Basic常溫恒溫DNA快速擴增酶，用于DNA擴增，電泳檢測
Exo	Exo常溫恒溫DNA快速擴增酶，用于DNA擴增，熒光檢測
nfo	nfo常溫恒溫DNA快速擴增酶，用于DNA擴增，試紙條檢測
RT-Basic	RT-Basic常溫恒溫RNA快速擴增酶，用于RNA擴增，電泳檢測
RT-Exo	RT-Exo常溫恒溫RNA快速擴增酶，用于RNA擴增，熒光檢測
RT-nfo	RT-nfo常溫恒溫RNA快速擴增酶(核酸試紙條型)，用于RNA擴增，試紙條檢測
LFD	一次性核酸檢測試紙條/可視化核酸檢測試紙條/橫向流動試紙條LFD

RPA是什么？

基本原理:
重組酶聚合酶擴增（Recombinase Polymerase Amplification，RPA），被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術。RPA技術主要依賴于三種酶：能結合單鏈核酸（寡核苷酸引物）的重組酶、單鏈DNA結合蛋白（SSB）和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性，最佳反應溫度在37°C左右。

重組酶聚合酶擴增（Recombinase Polymerase Amplification，RPA）技術，在恒溫37-42℃條件下，模擬體內核酸復制機制，由各種蛋白酶參與，幫助DNA聚合酶復制DNA，以實現(xiàn)DNA的等溫擴增，反應產物以指數級增長，整個反應一般在20-30min內獲得可以檢測水平的產品。

重組酶與引物結合形成的蛋白-DNA復合物，能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列，就會發(fā)生鏈交換反應形成并啟動DNA合成，對模板上的目標區(qū)域進行指數式擴增。被替換的DNA鏈與SSB結合，防止進一步替換。在這個體系中，由兩個相對的引物起始一個合成事件。整個過程進行得非?？?，一般可在十分鐘之內獲得可檢出水平的擴增產物。

Isothermal amplified detection of DNA and RNA

 

本技術平臺開發(fā)的試劑盒具有較高的靈敏度，特異性，操作簡單，速度快，非常適合現(xiàn)場快速基因檢測用途，該技術可以廣泛應用于農業(yè)，林業(yè)，牧業(yè)，水產等領域的基因檢測、體外診斷、個性化用藥，遺傳分析，疾病診斷、流行病學監(jiān)測、食品安全檢測、生物安全檢測、病原微生物檢測、轉基因檢測，動物源性成分檢測，藥用植物真?zhèn)舞b定等領域。還可以用于急性傳染病和常見病原體流行病感染的早期分子診斷，有助于疾病的早期治療和防控，尤其是在經濟欠發(fā)達的地區(qū)，野外現(xiàn)場基因檢測，以及流行病爆發(fā)現(xiàn)場快速檢測鑒定。

引物設計:
RPA分析的關鍵在于擴增引物和探針的設計。PCR引物多半是不適用的，因為RPA引物比一般PCR引物長，通常需要達到30-38個堿基。引物過短會降低重組率，影響擴增速度和檢測靈敏度。在設計RPA引物時，變性溫度不再是影響擴增引物的關鍵因素。RPA的引物和探針設計不像傳統(tǒng)PCR那樣成熟，用戶需要自己摸條件進行優(yōu)化。

優(yōu)勢:
常規(guī)PCR必須經過變性、退火、延伸三個步驟，而PCR儀本質上就是一個控制溫度升降的設備。RPA反應的最適溫度在37℃-42℃之間，無需變性，在常溫下即可進行。這無疑能大大加快PCR的速度。此外，由于不需要溫控設備，RPA可以真正實現(xiàn)便攜式的快速核酸檢測。

據介紹，RPA檢測的靈敏度很高，能夠將痕量的核酸（尤其是DNA）模板擴增到可以檢出的水平，從單個模板分子得到大約1012擴增產物。而且RPA還用不著復雜的樣品處理，適用于無法提取核酸的實地檢測。

技術優(yōu)勢及特點：

1. 對簡單樣品，如全血，唾液，脫落細胞，游離細胞等，37-42℃恒溫擴增15-20min即可完成核酸擴增和檢測。對于復雜樣品需進行樣品前處理，加上核酸擴增及檢測，整個過程也不超過30分鐘。而常規(guī)檢測方法都是現(xiàn)場采集，再長途運輸到專業(yè)實驗室，最后還需專業(yè)人員檢測3-5小時。

2. 可以廣泛應用于農業(yè)，林業(yè)，牧業(yè)，水產等領域的基因檢測、體外診斷、個性化用藥，遺傳分析，疾病診斷、流行病學監(jiān)測、食品安全檢測、生物安全檢測、病原微生物檢測、轉基因檢測，動物源性成分檢測，藥用植物真?zhèn)舞b定等領域。

3. 檢測的靈敏度很高，能夠將痕量的核酸模板擴增到可以檢出的水平，從單個模板分子得到大約10¹²擴增產物。而且不需要復雜的樣品處理，適用于無法提取核酸的實地檢測。

4. 此技術既可以擴增DNA也可以擴增RNA，還省去了額外的cDNA合成步驟。不僅可以對擴增產物進行終點檢測（凝膠電泳檢測），還可以對擴增過程進行實時監(jiān)控（實時熒光定量檢測，速度最快！15-20min擴增檢測出結果），甚至可以通過試紙條（側流層析試紙條）讀取結果。